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ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity)-Fcγ-NFAT/Jurkat

CBP74003

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I. Background

      抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用(ADCC,antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity )是指抗體的 Fab 段結(jié)合病毒感染的細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞的抗原表位,其 Fc 段與殺 傷細(xì)胞(NK 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等)表面的 FcR 結(jié)合,介導(dǎo)殺傷細(xì)胞直接殺傷靶細(xì)胞,它是 抗腫瘤的治療性抗體藥物發(fā)生作用的一種作用重要機(jī)制。

      傳統(tǒng)用于測定 ADCC/ADCP 的方法主要依賴于相關(guān)原代免疫細(xì)胞的分離、體外分化, 進(jìn)而測量靶細(xì)胞的殺傷或吞噬效應(yīng)。這些方法高度依賴供體原代細(xì)胞,價格昂貴且費(fèi)時費(fèi) 力,對原代細(xì)胞的分離分化過程對實驗操作的要求非常高,實驗失敗風(fēng)險較大,由于分離 分化細(xì)胞純度問題,還存在檢測信號低以及不穩(wěn)定均一的問題。另外,原代細(xì)胞具有不可 再生性,每次實驗的細(xì)胞供體來源可能都不一致,實驗結(jié)果可重復(fù)性較差,可能存在批次 差異。由于以上這些因素的影響,在需要高質(zhì)量控制的藥物開發(fā)過程中,很難建立穩(wěn)定可 靠的檢測方法。

 
II. Description

      ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat 報告基因藥靶模 型很好的模擬了體內(nèi) ADCC 的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,原理見下圖所示。



Figure 1. 
ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat 細(xì)胞模型原理圖

 
III. Introduction
Host Cell: Jurkat
Expressed gene: NFAT-Luc-CD16(V158)
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Synonym(s): Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+300μg/ml hygromycin+1μg/ml puromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Immediately upon receipt, store in liquid nitrogen.
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Peripheral blood
Disease: Acute T cell leukemia
Morphology: Lymphoblast
Growth Properties: Suspension
 
Ⅴ. Representative Data

Figure 2. Recombinant ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity)-Fcγ-NFAT/Jurkat stably expressing CD16aV158).

Figure 3. Dose response of CD20 Ab in ADCC Bioassay Effector Cell (High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat cell(C36). Dose response of TNFα Abs in ADCC Bioassay Effector Cell V variant(High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat cell(C36)with Membrane Anchored TNFα Cells(Suspended,C5).



Figure 4. Dose response of TNFα Abs in ADCC Bioassay Effector Cell V variant(High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat cell(C36)with Membrane Anchored TNFα Cell (Adherent,C12).

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